Методи за отстраняване на грунд Димер

верижна реакция на полимераза, или PCR , е техника в молекулярната биология се използва за амплифициране на специфични региони на ДНК . PCR зависи от праймери , които са къси вериги на ДНК , които са комплементарни и специфични за ДНК от интерес . Докато грундове обикновено се свързват с ДНК съвпадение на тяхната последователност , те от време на време ще се свързва с и се усилват взаимно , вкарвайки на феномен, известен като грунд dimer.Things ви е нужно
Грунд последователности

Показване повече инструкции <Бразилски>
1

Изследвай съдържанието на GC ( броят на G и C е ) в последователност грунд. GC свързване е по-силен , отколкото на свързване поради допълнителното водородна връзка между гуанин и цитозин . Оптимално залепване е най-малко 50 на сто съдържание на GC .

2

Изследвай температурата на изпичане на вашата реакция . Ниските температури на хибридизация обикновено се определят като 55 ° С или по-долу , може да предизвика неспецифично свързване на праймер , който може да доведе до праймерни димери в допълнение към усилване на неправилни геномни участъци .

3

Двойно -Проверка количеството и концентрацията на грундове сте добавили към PCR. Излишък на грундове, като цяло повече от 75 пикомола , може да доведе до грунд димери , както добре.

Вашият коментар