Предимства и недостатъци на Western Blot

Western блот , аналитична техника, използвана да се установят специфичен протеин в дадена проба , са заети способността на ензим или флуоресцентно -белязани първично антитяло се свързва към неговата специфична антиген . Това е процес от три етапа , започващ с гел електрофореза , последвано от мембрана блотинг и сондиране с антитела . Откриване на протеин може да бъде пряко или непряко , като последното се използва белязано вторично антитяло, насочено срещу основната . Въпреки че приема като рутинна техника анализ на протеини , Западна петно ​​има ограничения, както и ползи. Предимство: Чувствителност

Една от най-големите аргументи в полза на Западна петно ​​е неговата чувствителност. Поради способността си да открива най-малко 0,1 нанограма на протеин в пробата , техниката може теоретично да служи като ефективен рано диагностичен инструмент , наблюдение и най-малкото имуногенен отговор от вирус или бактерии в проба от пациент . Косвено Western Blot допълнително се основава на тази чувствителност от способността на вторично антитяло за усилване на интензивността на сигналът проследен от системата за обработване на изображения . По-голяма чувствителност означава, че са необходими по-малко антитела за тестване, което съкращава лабораторни разходи значително

Advantage : . Специфика

Западната петно ​​техниката дължи своята специфичност към две големи допринасящ фактори . Първо, гел електрофореза сортира проба в протеини с различен размер , заряд, и конформация . Този процес по себе си е огромна крачка към откриване , като ленти , образувани в гела вече дават следи за размера на протеина или полипептида от интерес . Специфичността на взаимодействието антитяло – антиген служи като втори голям фактор. Поради специфичните антитела показват афинитет към специфични белтъци , процесът може селективно определяне на целеви протеин дори в смес от 300 хиляди различни протеини

Вашият коментар