При свързване на нуклеинови киселини или протеини , високо -свързващ материал, наречен PVDF ( поливинил дифлуорид ) мембрана осигурява подкрепа за антителата . Чрез уестърн блотинг , мембраните са подредени заедно , получени за антитялото и след това се сушат . Протокол за сушене на мембраната изисква знания за това как работят мембрани , катодни плочи , анодни плочи и прилагане на метанол решения. С правилния протокол , мембраната безопасно свързва със специфичното антитяло и е готов за незабавна употреба или съхранение. Подготовка мембраната

Подготовка на PVDF мембрана почиства и стабилизира мембраната преди прехвърлянето. Преди изсушаване , мембраната е “ блокиран “ за да се предотврати свързване от нищо друго освен специфичните нуклеинови киселини , като неспецифични антитела . По време на тази процедура, вие wet мембраната чрез полагане върху плоска повърхност, покрита в метанол. Мембраната променя цвета си по време на тази фраза , от непрозрачно към полупрозрачна . След като приключите с метанол баня , мембраната се поставя в дейонизирана вода, за да кисне в продължение на около две минути. Мембраната трябва след това отново се накисва в разтвор на метанол , който е силно кисела .

Събрание на Мембраните Преди Transfer

Два от документите за мембранни се накисват в първото решение метанол и се поставя върху анод плоча . По време на този процес , трябва внимателно да проверите за въздушни балончета , които биха могли да компрометират трансфера. Друго парче от филтърна хартия се накисва във втория разтвор на метанол и се поставя на върха на стека. A гел след това отива на върха на мембраната , с грижа да не притиснете въздушни мехурчета между прилагането на гел и мембрана. Три нови парчета хартия, след това се накисват в катоден буфер и се поставят на върха на гела. Ако се появи въздух бълбука , епруветка работи, за да се изгладят мембраните .