В имуноанализ на свързващия капацитет в контейнер или в микроплаката ямки е по-висока от сумата на протеин се поставя в контейнера или ямки. За намаляване или предотвратяване на антитела или други видове протеини и молекули от усвояването на контейнера или на ямките , анализът трябва да се промие с подходящ буфер и специфични блокиращи реагент трябва да се добавят . Видът на буфер и избрал блокиране реагент зависи от вида на експериментални assay.Things ви е нужно
Плейт кладенци
Буферен разтвор
Блокиране реагент
на пипетата,
Antigen
антитела <Бразилски>
Покажи MoreInstructions в
1
Герб на плочите кладенците с антигена. Използвайте антиген разреждане . Чистите разтвори на антиген не е необходимо , тъй като само около 3 процента на протеин в пробата е целевия протеин . При разреждане , гарантира, че пробите съдържат антиген в концентрация, която е в границите на откриване на антитялото . С пипета разтвор антиген разреждане надолу кладенците на плочите . Някои плочи могат да бъдат предварително покрити с антиген . Прочетете инструкциите, приложени към ямките на плаката .
2
Покрийте плочките с лепило пластмаса и се оставя да пренощува . Измийте плаките с буферни разтвори , като Tris – буфериран физиологичен разтвор или фосфат – буфериран физиологичен разтвор . За да се измие , да се изплакнат плочите с помощта на преса бутилка напълнена с буферен разтвор с над лаборатория мивка. Пат плочите с хартиена кърпа, за да премахнете всички останали капки буферен разтвор . Наем 3
Намалете неспецифично свързване на протеини и молекули с помощта на блокиране буфер или реагент , като препарат блокер, сухо мляко или говежди серум. В зависимост от типа на блокиране реагент се използва, ще зависи от анализа. Добавете блокиране реагент към ямките с помощта на пипета. Покрийте плаката отново с лепило пластмаса и се оставя да пренощува .
4
Re – мият отново ямките на плаката с помощта на буферен разтвор . Тези стъпки ще намали количеството на неспецифично свързване, което може да се случи в ямките на плаката преди добавяне на необходимото антитяло разтвор за процедурата . В допълнение, блокиращи реагенти може да помогне за намаляване на фоновите цветове в резултатите от анализите .